生 物质谱技术是蛋白质组学研究中最重要的鉴定技术,其基本原理是样品分子离子化后,根据不同离子之间的荷质比(M/E) 的差异分离并确定其分子量。对于经过双向电泳分离的目标蛋白用膜蛋白酶酶解(水解Lys或Arg的C端形成的肤键)成肽段,对这些肽段用质谱进行鉴定与分 析。目前常用的质谱包括两种:基质辅助激光解吸电离一飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS) 和离子阱质谱(ESI-MS) 。通过两种质谱的方法联用,获得有意义的蛋白质的肽段序列, 设计探针或引物来获得有意义的基因。随着蛋白质组研究的深入, 又能有多种新型的质谱仪出现,主要是在上述质谱仪基础上进行改进和重新组合。
服务内容:
全蛋白的MALDl-TOF分析项目, 包括全蛋白的MALDI-TOF分析,单一蛋白肽指纹图( PMF) ,蛋白质质谱鉴定(MALDl-TOF/TOF);
LC-ESI-MS/MS分析项目:(1) SDS胶带及2DE胶点的蛋白质鉴定:LC-ESI-MS/MS. (2) 蛋白质混合物酶解样品的一维、二维色谱-ESI-MS/MS. (3) 未知蛋白质的部分酶解片段的de novo 测序。( 4 ) 确定小分子药物、正常及病理代谢中间物的准确分子量。混合样品的蛋白质组鉴定(LC-MS/MS)。
服务价格及周期:
服务编号 | 服务内容 | 服务周期 | ||
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S5009-1 | 蛋白质及多肽质量分析 仪器型号 MALDI-TOFITOF | 3天 | ||
S5009-2 | 蛋白质质谱鉴定 (MALDI-TOFITOF) 仪器型号 MALDl-TOFITOF | 3天 | ||
S5009-3 | SDS胶带及2DE胶点的蛋白质鉴定 仪器型号LC-ESI-MS/MS | 5天 | ||
S5009-4 | 蛋白质混合物酶解样品 仪器型号LC-ESI-MS/MS | 8天 | ||
S5009-5 | 代谢中间物等小分子 仪器型号 LC-ESI-MS/MS | 4天 | ||
S5009-6 | 未知蛋白质的酶解片段的de novo测序 仪器型号LC-ESI-MS/MS | 5天 |
客户须知:
- 蛋白质及多肽质量分析:样品总量> 1pmol (10 12 mol);采用MALDI -TOF/TOF 级质谱分析;
- 单一蛋白质的质谱鉴定:样品总量>10 fmol (1ox 10 15 mol) ,超纯trypsin(蛋白质组学级)充分酶解。采用MALDI-TOF/TOF二级质谱分析。
- SDS胶带及2DE胶点的蛋白质鉴定:超纯trypsin (蛋白质组学级)充分酶解并萃取:采用LC-ESI-MS/MS二级质谱分析。
- 蛋白质混合物酶解样品:样品总量> 10 ug (2X 10 "g);采用LC-ES I-MS /MS =级质谱分析。
- 小分子及代谢中问物等:样品总量>1 ug (1 X 10 5 g) 采用LC-ESI-MS/MS =级质谱分析。
- 未知蛋白质的部分酶解片段的de novo 测序;充分酶解,样品纯度尽可能高;质谱分析后进行;测序长度一般为4-11个残基,不同样品会有差异。利LC-ESI-MS/MS 二级质谱的数据进行分析。
- 去垢剂及低质量塑料Ep管会较大的影响鉴定结果,请保持样品不受污染。
- 理论上可以鉴定各种来源不同的蛋白质,按照蛋白质组学里常规酶解方法酶解即可。
- 其他疑问可直接向技术人员咨询。
- 未知蛋白质的酶解片段的de novo 测序长度为4-11残基。
服务内容:
1.MALDI-TOF/TOF分析项目:
- 全蛋白质MALDI -TOF分析:提供质谱图。
- 单一蛋白质肽指纹图(PMF),蛋白质质谱鉴定( MALDI-TOF/TOF);提供质谱图及Mascot搜库结果。
2.LC-ESI-MS/MS分析项目:
- SDS胶带及2DE胶点的蛋白质鉴定:提供结果文件及Mascot搜库结果;
- 蛋白质混合物酶解样品的一维、二维色谱ESI -MS/MS 提供结果文件及Mascot搜库结果;
- 未知蛋白质的部分酶解片段的de novo 测序:提供序列及质谱图;
- 确定小分子药物、正常及病理代谢中间物的准确分子量:提供分子量及质谱图。
服务承诺:
- 对于我方原因导致的无结果,不收费;
- 因样品本身的问题导致的鉴定无结果,收取一半的费用;
- 在规定时间内保质保量完成委托任务。