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蛋白质质谱分析

来源:wang 发布时间:2014/7/9 11:39:01

蛋白质质谱分析

生 物质谱技术是蛋白质组学研究中最重要的鉴定技术,其基本原理是样品分子离子化后,根据不同离子之间的荷质比(M/E) 的差异分离并确定其分子量。对于经过双向电泳分离的目标蛋白用膜蛋白酶酶解(水解Lys或Arg的C端形成的肤键)成肽段,对这些肽段用质谱进行鉴定与分 析。目前常用的质谱包括两种:基质辅助激光解吸电离一飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS) 和离子阱质谱(ESI-MS) 。通过两种质谱的方法联用,获得有意义的蛋白质的肽段序列, 设计探针或引物来获得有意义的基因。随着蛋白质组研究的深入, 又能有多种新型的质谱仪出现,主要是在上述质谱仪基础上进行改进和重新组合。

服务内容:

全蛋白的MALDl-TOF分析项目, 包括全蛋白的MALDI-TOF分析,单一蛋白肽指纹图( PMF) ,蛋白质质谱鉴定(MALDl-TOF/TOF);

LC-ESI-MS/MS分析项目:(1) SDS胶带及2DE胶点的蛋白质鉴定:LC-ESI-MS/MS. (2) 蛋白质混合物酶解样品的一维、二维色谱-ESI-MS/MS. (3) 未知蛋白质的部分酶解片段的de novo 测序。( 4 ) 确定小分子药物、正常及病理代谢中间物的准确分子量。混合样品的蛋白质组鉴定(LC-MS/MS)。

服务价格及周期:

 

服务编号 服务内容   服务周期  
S5009-1 蛋白质及多肽质量分析 仪器型号 MALDI-TOFITOF   3天  
S5009-2 蛋白质质谱鉴定 (MALDI-TOFITOF) 仪器型号 MALDl-TOFITOF   3天  
S5009-3 SDS胶带及2DE胶点的蛋白质鉴定 仪器型号LC-ESI-MS/MS   5天  
S5009-4 蛋白质混合物酶解样品 仪器型号LC-ESI-MS/MS   8天  
S5009-5 代谢中间物等小分子 仪器型号 LC-ESI-MS/MS   4天  
S5009-6 未知蛋白质的酶解片段的de novo测序 仪器型号LC-ESI-MS/MS   5天  

客户须知:

  1. 蛋白质及多肽质量分析:样品总量> 1pmol (10 12 mol);采用MALDI -TOF/TOF 级质谱分析;
  2. 单一蛋白质的质谱鉴定:样品总量>10 fmol (1ox 10 15 mol) ,超纯trypsin(蛋白质组学级)充分酶解。采用MALDI-TOF/TOF二级质谱分析。
  3. SDS胶带及2DE胶点的蛋白质鉴定:超纯trypsin (蛋白质组学级)充分酶解并萃取:采用LC-ESI-MS/MS二级质谱分析。
  4. 蛋白质混合物酶解样品:样品总量> 10 ug (2X 10 "g);采用LC-ES I-MS /MS =级质谱分析。
  5. 小分子及代谢中问物等:样品总量>1 ug (1 X 10 5 g) 采用LC-ESI-MS/MS =级质谱分析。
  6. 未知蛋白质的部分酶解片段的de novo 测序;充分酶解,样品纯度尽可能高;质谱分析后进行;测序长度一般为4-11个残基,不同样品会有差异。利LC-ESI-MS/MS 二级质谱的数据进行分析。
  7. 去垢剂及低质量塑料Ep管会较大的影响鉴定结果,请保持样品不受污染。
  8. 理论上可以鉴定各种来源不同的蛋白质,按照蛋白质组学里常规酶解方法酶解即可。
  9. 其他疑问可直接向技术人员咨询。
  10. 未知蛋白质的酶解片段的de novo 测序长度为4-11残基。

服务内容:

1.MALDI-TOF/TOF分析项目:

  1. 全蛋白质MALDI -TOF分析:提供质谱图。
  2. 单一蛋白质肽指纹图(PMF),蛋白质质谱鉴定( MALDI-TOF/TOF);提供质谱图及Mascot搜库结果。

2.LC-ESI-MS/MS分析项目:

  1. SDS胶带及2DE胶点的蛋白质鉴定:提供结果文件及Mascot搜库结果;
  2. 蛋白质混合物酶解样品的一维、二维色谱ESI -MS/MS 提供结果文件及Mascot搜库结果;
  3. 未知蛋白质的部分酶解片段的de novo 测序:提供序列及质谱图;
  4. 确定小分子药物、正常及病理代谢中间物的准确分子量:提供分子量及质谱图。

服务承诺:

  1. 对于我方原因导致的无结果,不收费;
  2. 因样品本身的问题导致的鉴定无结果,收取一半的费用;
  3. 在规定时间内保质保量完成委托任务。
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