服务简介:
转染技术的选择对转染结果影响很大，许多转染方法需要优化DNA与转染试剂比例，细胞数量，培养及检测时间等。本公司主要的转染方法：脂质体转染法、电穿孔转染法、病毒感染法。
服务内容:
1.脂质体转染法
阳离子脂质体表面带正电荷，能与核酸的磷酸根通过静电作用，将DNA分子包裹入内，形成DNA脂复合物，也能被表面带负电的细胞膜吸附，再通过融合 或细胞内吞进入细胞。脂质体转染适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前实验室最方便的转染方法之一，其转染率较高，优于磷酸钙法。由于脂质体 对细胞有一定的毒性，所以转染时间一般不超过24小时。常用细胞类型：cos-7 、BHK、NIH3T3 、Hela等。
2.电穿孔转染法
电流能够可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内，这种方法就是电穿孔。当遇到某些脂质体转染效率很低或儿乎无法转入时 建议用电穿孔法转染。一般情况下，高电场强度会杀死50%-70% 的细胞。本公司针对细胞死亡研发出了一种电转保护剂， 大大的降低了细胞的死亡率，同时也提高了电穿孔转染效率。
3.病毒感染
对于脂质体转染与电穿孔转染都无法成功转染的细胞系建议用病毒感染，此法可以快速100%感染，检测成功率高。
|
细胞 |
原代神经细胞 |
原代狗间质干细胞 |
原代小鼠间质干细胞 |
A431 |
THP-1 |
LA-4 |
HL-60 |
HepG-2 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
|
脂质体转染效率 |
3% |
0% |
0% |
4% |
2% |
5% |
10% |
30% |
|
Etrans kit转染效率 |
30% |
70% |
45% |
50% |
70% |
40% |
60% |
65% |
服务价格及周期：
| 服务编号 | 服务内容 | 服务周期 | ||
|---|---|---|---|---|
| S4004-1 | 客户提供细胞或代购 | 1周 | ||
| S4004-2 | 细胞传代培养 | 1周 | ||
| S4004-3 | 转染荧光质粒，荧光显微镜下检测细胞转染率并成像 | 1周 |
客户须知：
- 客户提供生民状况良好的细胞株，同时提供细胞特性，培养条件及相关注意事项；公司也可以为客户代购细胞并且提供保种服务；
- 客户提供质粒，详细说明该质粒的大小、浓度、抗性、拷贝数等相关背景资料；
- 客户提供的质粒需要有检测标签如：EGFP或者LacZ等，若没有则认为质粒的转染效率和对照质粒pEGFP-N1的转染效率一致。
服务承诺：
- 提供转染目的质粒前后的细胞培养图片和荧光图片;
- 提供目的质粒的转染效率和转染方案。
常规细胞转染数据
|
细胞名称 |
HEK-293 |
He!a |
Hepal-6 |
NIH-3 T3 |
HSC-T6 |
|
转染效率 |
90% |
75% |
60% |
70% |
50% |
